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端粒長度檢測
發(fā)布時間: 2023-10-24 點擊次數(shù): 957次TRF 法:科研和臨床金標(biāo)準(zhǔn)
QPCR法: 操作簡便,用時短,適用于批量檢測
TRF法檢測端粒長度
TRF分析也稱作端粒的Southern印跡法,是應(yīng)用針對端粒重復(fù)序列的探針來檢測限制性酶切后所 保留的端粒的方法。
限制性酶會將基因組DNA消化為短的片段, 留下 大量完好的端粒,即所謂的端粒限制性片段。
以凝膠電泳分離基因組片段 ,通過放射性探針 (CCCTAA)。
QPCR法檢測端粒長度
端粒為染色體末端GGGATT 6堿基 重復(fù)序列 ,設(shè)計PCR引物十分困難(二聚體不可避免) ,也無法設(shè)計 Taqman探針
2002年 , Richard通過引物中引入 突變 ,減少二聚體的產(chǎn)生 ,成功利 用SYBR Green染料法測定端粒的相對長度。