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產(chǎn)酸克雷伯菌對實驗鼠的危害與檢測
發(fā)布時間: 2025-06-20 點擊次數(shù): 121次產(chǎn)酸克雷伯菌是克雷伯菌屬中的一個重要物種,形態(tài)呈直桿狀,通常較粗短,大多數(shù)菌株具有多糖莢膜,無鞭毛,無芽孢。
根據(jù)中國國標(biāo)GB14922-2022《實驗動物微生物、寄生蟲學(xué)等級及監(jiān)測》產(chǎn)酸克雷伯菌未被列為SPF級動物必須排除的病原體。
但杰克遜(JAX)實驗室作為優(yōu)秀的遺傳資源庫和實驗動物供應(yīng)商,對實驗動物的微生物質(zhì)量控制極為嚴(yán)格。產(chǎn)酸克雷伯菌被JAX實驗室明確列為“排除性病原體",即其供應(yīng)的所有品系實驗動物(尤其是免疫缺陷品系)均要求無此菌定植。免疫缺陷小鼠是該菌的高風(fēng)險群體,研究發(fā)現(xiàn),免疫缺陷小鼠中產(chǎn)酸克雷伯菌的檢出率達(dá)4.55%。
其造成的風(fēng)險如下:
機會性致病性:可導(dǎo)致免疫缺陷小鼠(如NSG、NOG品系)的致命性感染(敗血癥、肺炎)。
干擾實驗結(jié)果:在腸道、呼吸道或系統(tǒng)性感染模型中可能改變免疫反應(yīng)或病理結(jié)局。
耐藥性風(fēng)險:其多重耐藥性可能影響抗生素治療實驗的可靠性。
陽性結(jié)果處理
立即隔離:陽性動物及同籠動物移至獨立隔離設(shè)施。
群體處置:
免疫健全鼠:嘗試抗生素治療(根據(jù)藥敏,如阿米卡星+頭孢他啶)。
免疫缺陷鼠:直接淘汰(因治療無效且高致死風(fēng)險)。
設(shè)施凈化:
過氧化氫蒸氣或含氯消毒劑處理環(huán)境;
連續(xù)3次環(huán)境檢測陰性(間隔1周)后方可重啟。
質(zhì)量控制體系
標(biāo)準(zhǔn)菌株:ATCC13182定期驗證PCR及生化試驗準(zhǔn)確性。
環(huán)境監(jiān)測:每月對IVC籠具出風(fēng)口、飲水系統(tǒng)采樣,采用PCR篩查。
人員操作:無菌服+手套+口罩,單向物流避免交叉污染。
滅菌管理:
飼料/墊料:121℃高壓滅菌30分鐘或鈷-60輻照(≥25kGy);
飲水:酸化處理(pH2.5-3.0)抑制革蘭陰性菌生長。
JAX實驗室檢測方法
選擇性培養(yǎng)+生化確認(rèn)
麥康凱瓊脂分離→挑取粘稠乳糖發(fā)酵(粉紅色)菌落→革蘭染色→關(guān)鍵生化試驗(吲哚+、鳥氨酸+)。輔助檢測:VP試驗(+)、檸檬酸鹽利用(+)、尿素酶(+)
PCR檢測
金標(biāo)準(zhǔn)方法:使用多種特異性引物,靈敏度高(可檢測低載量菌),特異性強。
測序驗證
對疑似菌株進(jìn)行基因測序確認(rèn)。
JAX實驗室相比普通商業(yè)供應(yīng)商的培養(yǎng)法+生化鑒定更注重PCR實驗。翼和病原菌檢測試劑盒能夠很好的檢測產(chǎn)酸克雷伯菌在內(nèi)的多種病原微生物,符合實驗室的要求,使用的Biowing®Common Bacteria Primer&Probe能夠匹配到目標(biāo)病原微生物的DNA。